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噬菌體是病毒嗎?噬菌體侵染細菌實驗過(guò)程解析!
噬菌體是一類病毒,原指細菌病毒,近年來發(fā)現真菌、藻類都(dōu)有噬菌體。噬菌體體積微小,隻有在電子顯微鏡下才能(néng)看見,是一種(zhǒng)非細胞結構的生命,但隻有進(jìn)入宿主細胞才具有生命特征,并具有寄主專一性,其結構簡單,包括蛋白質外殼和包裹在中間的遺傳物質——一個單一的核酸分子(DNA或RNA)。
在遺傳上研究得較清楚的是大腸杆菌的T系噬菌體,其外形一般呈蝌蚪狀,隻相當于它的寄主大腸杆菌體積的1/1000,每個噬菌體大約是由等量的蛋白質和DNA組成(chéng)。它的雙股DNA分子包在蛋白質外殼裡(lǐ),形成(chéng)“頭部”,“尾部”則由幾個不同的部分組成(chéng):有領、髓、鞘、基盤、尾釘和尾絲,它們都(dōu)是由蛋白質組成(chéng)。
就(jiù)噬菌體與宿主的關系而言,可分爲烈性噬菌體和溫和噬菌體兩(liǎng)大類。
烈性噬菌體感染宿主細胞時(shí),例如大腸杆茵的T4噬菌體以其尾部吸附在細菌表面(miàn)上,然後(hòu)將(jiāng)其遺傳物質DNA注入寄主細胞内,借用寄主的代謝機器複制噬菌體的DNA和合成(chéng)噬菌體的蛋白質,然後(hòu)將(jiāng)這(zhè)些DNA和蛋白質組裝成(chéng)許多新的噬菌體,這(zhè)時(shí)噬菌體通過(guò)宿主細胞的裂解而釋放出來,以後(hòu)這(zhè)些新的子代噬菌體又去感染附近的細菌,并將(jiāng)它們裂解,如此反複,結果便在長(cháng)滿細菌的平闆培養基上,形成(chéng)一個不長(cháng)細菌的透明斑,即噬菌斑。而溫和噬菌體在侵入宿主細胞後(hòu),其DNA可以和宿主細胞的染色體整合在一起(qǐ),并與宿主細胞同步複制,宿主細胞并不裂解。
噬菌體侵染細菌的實驗過(guò)程:
1、培養用p32和s35标記的大腸杆菌,再用此大腸杆菌培養噬菌體。p32用于标記噬菌體蛋白質,s35用于标記噬菌體DNA。
2、用培養後(hòu)的p32和s35噬菌體侵染未被标記的的大腸杆菌。
3、培養物離心,分離。
4 、分别對(duì)上清液和沉澱物的放射性進(jìn)行檢測。上清液中有S35,而沉澱中幾乎沒(méi)有;沉澱中有P32而上清液中幾乎沒(méi)有。
Alfed Hershey和Martha Chase將(jiāng)宿主大腸杆菌細胞分别放在含放射性同位素35S或32P的培養基中,用35S标記蛋白質,32P标記蛋DNA。宿主細胞在生長(cháng)過(guò)程中就(jiù)被35S或32P标記上了。然後(hòu)用T2噬菌體分别感染被35S或32P标記的細菌,并在這(zhè)些細菌中複制增殖。
宿主菌裂解釋放出很多子代噬菌體,這(zhè)些子代噬菌體也被标記上35S或32P。然後(hòu)用分别被35S,或32P标記的噬菌體去感染沒(méi)有被放射性同位素标記的宿主菌,然後(hòu)測定宿主菌細胞帶有的同位素。被35S标記的噬菌體所感染的宿主菌細胞内很少有35S,而大多數35S出現在宿主菌細胞的外面(miàn)。
也就(jiù)是說(shuō),35S标記的噬菌體蛋白質外殼在感染宿主菌細胞後(hòu),并未進(jìn)入宿主菌細胞内部而是留在細胞外面(miàn)。被32P标記的噬菌體感染宿主菌細胞後(hòu),測定宿主菌的同位素,發(fā)現32P主要集中在宿主菌細胞内。所以噬菌體感染宿主菌細胞時(shí)進(jìn)入細胞内的主要是DNA。