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研發(fā)創新,我們一直在路上||一株高裂解率噬菌體沙門氏菌噬菌體的分離及其應用
歐盟自1999年起(qǐ)就(jiù)開(kāi)始禁止飼料中大量添加抗生素使用,且歐盟以及美國(guó)等地區和國(guó)家較早就(jiù)開(kāi)始監控本地區的抗藥性問題,其結果顯示:沙門氏菌對(duì)多種(zhǒng)抗生素均具有較高抗藥性,且多重抗藥性問題也日益嚴重。
在沙門氏菌病治療中,采用抗生素控制,可以迅速有效遏制沙門氏菌疫病在養殖禽類中的蔓延。然而在實際養殖中,常采用廣譜抗生素或大量使用藥物,緻使細菌對(duì)抗生素的抗藥性逐步提高,藥物逐漸失效。
哈巴河縣洪昇科技服務有限公司研發(fā)團隊經(jīng)過(guò)大量的噬菌體篩選試驗,對(duì)分離的噬菌體進(jìn)行裂解譜測試、生物學(xué)特性測試等最終獲得了一株高裂解率的沙門氏菌噬菌體,能(néng)夠高效裂解多種(zhǒng)沙門氏菌,并已獲得發(fā)明專利。
噬菌體的RTD實驗
在平闆上劃分區域,將(jiāng)一滴宿主菌(約100 μL)滴加到區域中心處,晾幹,將(jiāng)不同稀釋度的一滴噬菌體液滴加到宿主菌的斑點上,晾幹,37℃培養16-24h。根據宿主菌生長(cháng)狀況,凡是不能(néng)連片生長(cháng)的,稱爲CL濃度(CL濃度是可以完全性裂解環境中宿主菌的濃度,可以用于指導生産實踐的稀釋方案)。結果如下圖,稀釋106倍後(hòu)對(duì)宿主菌仍有較好(hǎo)的裂解效果。
噬菌體的裂解效果
選取實驗室保存分離的沙門氏菌,用分離的噬菌體對(duì)其裂解,顯示該噬菌體可裂解多種(zhǒng)血清型的細菌,表明該噬菌體的裂解譜較廣,可用于多種(zhǒng)雞沙門氏菌病的治療。
部分可裂解細菌的血清型分布
治療雞沙門氏菌感染的試驗
給藥5天之後(hòu),對(duì)不同實驗組的肉雞進(jìn)行解剖,攻毒組明顯的沙門氏菌症狀顯示其肝髒有白色斑點,包心嚴重,腸、腎出血,脾腫大,噬菌體治療組未發(fā)現明顯的病變,雞隻表現良好(hǎo)。