2021年第四屆歐洲噬菌體未來年會(huì)都(dōu)有哪些關注點？

  由Kisaco Research主辦的第四屆歐洲噬菌體未來年會(huì)于 2021 年 11 月 23 日至 24 日在比利時(shí)布魯塞爾舉行。該會(huì)議聚集了來自噬菌體行業學(xué)術背景各異的國(guó)際專家，他們對(duì)噬菌體及噬菌體相關療法的應用都(dōu)十分感興趣，會(huì)議從商業和監管的角度來關注噬菌體的治療及應用。

噬菌體應用的多樣性
    會(huì)議主要關注噬菌體在人體中的臨床應用（噬菌體療法），但也涵蓋了在動物工業中的應用（畜牧業和水産養殖）。
    天然噬菌體目前已被廣泛應用于臨床治療中，工程化噬菌體也已開(kāi)始在學(xué)術領域中使用，并較天然噬菌體更具有廣闊的應用前景。裂解酶（由噬菌體産生的活性酶，能(néng)夠水解細菌細胞壁）已受到PhagoMed、Bioharmony、Lysando和Micreos等公司的青睐，這(zhè)些公司均在開(kāi)發(fā)相應的裂解酶産品。但噬菌體應用不僅僅局限于噬菌體本身和裂解酶，還(hái)可以利用噬菌體顆粒作爲載體用于遞送靶向(xiàng)抗菌劑（如，Eligo Bioscience 利用CRISPR-Cas9系統選擇性地剪切細菌中攜帶的抗生素抗性或毒力基因等）。

噬菌體與細菌匹配
    選擇特異性的噬菌體來對(duì)抗特定的細菌菌株對(duì)于噬菌體治療至關重要。會(huì)議讨論了如何提高噬菌體篩選的速度和準确性。Ronen Hazan博士（以色列耶路撒冷大學(xué)首席研究員）、Bob Blasdel博士（Vesale Pharmaceuticals研究總監）和 Cindy Fevre博士（Pherecydes Pharma研發(fā)部總監）介紹了不同的噬菌體篩選經(jīng)驗以及他們傾向(xiàng)的方法。Hazan 博士指出了全面(miàn)檢測的重要性，即結合噬菌斑和動力學(xué)結果進(jìn)行篩選。Fevre博士也比較喜歡用這(zhè)兩(liǎng)種(zhǒng)方法篩選噬菌體，特别是當噬菌體用于治療患者時(shí)。
     此外，Blasdel博士介紹了Vésale Pharma公司采用的高通量篩選噬菌體方法，以滿足醫院和研究機構在短時(shí)間内選擇最佳噬菌體供患者使用的需求。這(zhè)種(zhǒng)方法是基于熒光素酶發(fā)光技術，檢測噬菌體裂解細菌後(hòu)ATP的釋放量，在一定範圍内ATP與熒光強度成(chéng)線性關系，因此可以通過(guò)測量熒光光強計算ATP釋放量，從而篩選出裂解性噬菌體。但這(zhè)種(zhǒng)方法的可靠性依賴前期對(duì)大量不同噬菌體的測定。因此，要結合動力學(xué)檢測盡可能(néng)多地測試噬菌體。
    最後(hòu)，Felix Biotechnology的聯合創始人Natalie Ma博士描繪了未來加速噬菌體-細菌匹配的可能(néng)性。Felix Biotechnology爲人工智能(néng)算法提供宿主細菌範圍數據，以便找到噬菌體用于侵染細菌的基因序列。

噬菌體制造的挑戰
    噬菌體制備工藝、GMP生産如何從小規模到大規模也是大會(huì)的主要議題。Jafral的首席運營官 Barbara Hubad 博士分享了她在GMP噬菌體大規模生産方面(miàn)的經(jīng)驗。Hubad博士認爲，GMP生産過(guò)程中最需要防控的是噬菌體的交叉污染，尤其是在同時(shí)使用不同的噬菌體制備雞尾酒時(shí)。另一個挑戰是，當從小規模上升到大規模時(shí)，噬菌體的穩定性可能(néng)也會(huì)有所變化。
    來自英國(guó)拉夫堡大學(xué)的Danish Malik博士介紹了批量化生産高滴度-純化噬菌體的工藝優化方面(miàn)的工作。他舉例說(shuō)，使用相對(duì)較小的體積連續生産噬菌體可以提高産量。幹粉劑型理論上能(néng)夠滿足所有噬菌體保持穩定的需求，盡管噬菌體的穩定性各不不同。
  Cellexus的技術應用專家Adam Ostrowski博士主張將(jiāng)一次性設備引入噬菌體生産中。Cellexus開(kāi)發(fā)了一種(zhǒng)生物反應器系統，該系統能(néng)提供快速、簡便的噬菌體生産，并通過(guò)使用一次性的濾袋將(jiāng)交叉污染降至最低。由于噬菌體GMP生産面(miàn)臨著(zhe)種(zhǒng)種(zhǒng)挑戰，業界對(duì)噬菌體的關注度也越來越高，并不斷爲噬菌體科學(xué)家尋求解決方案。
“固定雞尾酒”與“個體化”
    噬菌體應用經(jīng)常會(huì)面(miàn)臨一個争論，是應該使用“固定雞尾酒”法還(hái)是“個體化”噬菌體療法。Bob Blasdel博士支持建立小規模、單獨表征的噬菌體庫，然後(hòu)將(jiāng)其選爲活性藥物成(chéng)分并組合成(chéng)雞尾酒。此外，來自“臨床試驗”的細菌敏感性和有效性數據的反饋可以爲模型提供信息并改進(jìn)噬菌體的選擇标準。
    總體而言，目前的共識似乎是這(zhè)兩(liǎng)種(zhǒng)方法不是相互排斥的，而是互補的。臨床試驗傾向(xiàng)于于使用固定雞尾酒法，而在未來，從一個噬菌體庫中取出的一種(zhǒng)或幾種(zhǒng)噬菌體用于個體化治療可能(néng)是更有希望的方案。
臨床試驗的重要性
    本次大會(huì)衛生主管部門的代表Peter Beyer（世界衛生組織高級顧問）和Cara Fiore博士（微生物學(xué)家、食品和藥物管理局高級監管審查員）特别強調了進(jìn)行臨床試驗的必要性，用于評估噬菌體療法的安全性及有效性。
    Shawna McCallin博士（瑞士巴爾格裡(lǐ)斯特大學(xué)醫學(xué)院臨床協調員）客觀地概述了目前噬菌體治療領域的臨床試驗。目前有 26 項已注冊的噬菌體研究，其中 6 項正在積極招募，5 項已經(jīng)開(kāi)始——這(zhè)創噬菌體治療的曆史新高。她認爲，能(néng)否成(chéng)功通過(guò)二期臨床試驗是噬菌體治療的關鍵一步，因爲到目前爲止，在四項二期臨床研究中，有三項已失敗。她與 Sarah Djabara博士（比利時(shí)阿斯特麗德女王軍事(shì)醫院的傳染病醫生）一起(qǐ)協作創建了一個國(guó)際噬菌體治療數據庫。這(zhè)項國(guó)際倡議旨在以集中和标準化的方式收集數據，用以提高透明度并減少報告中的主觀偏見。
發(fā)展中國(guó)家的噬菌體療法
   抗菌素耐藥性（antimicrobial resistance, AMR）肆虐全球，據估計，到2050年AMR將(jiāng)導緻1000多萬人死亡。由于缺乏藥物，非洲和亞洲國(guó)家將(jiāng)付出慘痛代價。
    噬菌體促全球健康（Phages for Global Health）組織創始人兼總裁Tobi Nagel博士介紹了她的非營利慈善組織工作，該組織旨在促進(jìn)在非洲和亞洲使用噬菌體。由于AMR危機，需要避免在艾滋病和新冠疫情中出現的藥物交付延遲，實現這(zhè)一目标的一個方法是讓發(fā)展中國(guó)家爲本國(guó)人口生産藥物。爲此，她在國(guó)際和公共慈善基金的支持下推動在發(fā)展中國(guó)家建立噬菌體庫，建立噬菌體庫的第一步是在烏幹達、肯尼亞、加納和坦桑尼亞等非洲國(guó)家組織有關噬菌體分離的應用研讨會(huì)。超過(guò)1200名科學(xué)家接受了噬菌體生物學(xué)方面(miàn)的培訓，在整個非洲大陸分離出450株噬菌體，并創建了50個噬菌體項目。

噬菌體領域的未來
    5 年後(hòu)噬菌體療法的前景如何？
    随著(zhe)人們對(duì)抗生素耐藥性的認識不斷提高以及未來可用抗生素愈發(fā)缺乏，大家都(dōu)認爲噬菌體療法具有光明之路。對(duì)Hessel博士而言，微生物的精準靶向(xiàng)具有很大的前景，需要進(jìn)一步研究。另一方面(miàn)，Pirnay博士設想在更遙遠的未來能(néng)夠實現無細胞的即時(shí)生産噬菌體。最後(hòu)，Corsini博士和McCallin博士堅持臨床試驗的重要性，因爲目前正在進(jìn)行的臨床試驗數量比以往任何時(shí)候都(dōu)多，可能(néng)會(huì)更清楚地了解噬菌體治療的潛力。

結束語
    總之，2021 歐洲噬菌體未來大會(huì)證實了過(guò)去幾年中觀察到的一個趨勢：噬菌體的應用在國(guó)際上越來越受歡迎，開(kāi)始了更多的臨床試驗，公司推出了更多新産品和技術。噬菌體療法的安全性現在已經(jīng)得到了很好(hǎo)的證實，未來最大的挑戰依然是證明它的有效性。在治療細菌感染方面(miàn)，噬菌體、裂解酶或噬菌體衍生的抗菌劑等方法不應被排斥，而應補充到我們對(duì)抗抗菌素耐藥性的過(guò)程中。